Πρωτότυπος Τίτλος:
Μελέτη της in vitro ανάπτυξης υποψήφιων προβιοτικών στελεχών που έχουν απομονωθεί από τον εντερικό μικροβιόκοσμο υγιών νεογνών σε πρεβιοτικά υποστρώματα
Συγγραφέας:
Μολδοβανίδη, Τατιανή, Ισίδωρος
Επιβλέπων καθηγητής:
Κυριακού, Αδαμαντίνη
Περίληψη:
Εισαγωγή: Τα προβιοτικά είναι ζωντανοί μικροοργανισμοί που ζουν στον ανθρώπινο οργανισμό χωρίς να τον βλάπτουν και όταν χορηγούνται σε κατάλληλες ποσότητες παρέχουν οφέλη στην υγεία του ξενιστή, μέσω της παροδικής διαμόρφωσης του μικροβιόκοσμου του παχέος εντέρου. Επιστημονικές μελέτες δείχνουν ότι στη διαμόρφωση αυτή, μπορεί να συμβάλει ευεργετικά και η χορήγηση πρεβιοτικών, τα οποία είναι συστατικά που δεν διασπώνται από τον ξενιστή και περνούν άπεπτα στο παχύ έντερο, όπου μεταβολίζονται-ζυμώνονται από τον εντερικό μικροβιόκοσμο προκαλώντας επιλεκτική αύξηση της ανάπτυξης ή και της δραστηριότητας συγκεκριμένων βακτηριακών πληθυσμών που υπάρχουν ήδη στο παχύ έντερο. Ορισμένα προβιοτικά έχουν εμφανίσει αντιλιστεριακή δράση, γεγονός που προσέγγισε το
επιστημονικό ενδιαφέρον. Το Listeria monocytogenes είναι ένα από τα πιο ισχυρά τροφογενή παθογόνα βακτήρια, με ανθεκτικότητα σε συνθήκες επεξεργασίας τροφίμων, που μπορεί να γίνει επικίνδυνο για την υγεία του ξενιστή, ιδιαίτερα για ευαίσθητες ομάδες του πληθυσμού
όπως οι εγκυμονούσες ή οι ανοσοκατεσταλμένοι ασθενείς, ενώ σε ορισμένες περιπτώσεις μπορεί να οδηγήσει μέχρι και στο θάνατο.
Σκοπός: Α) Η μελέτη της καλλιέργειας και της ανάπτυξης in vitro προβιοτικών στελεχών, συγκεκριμένα λακτοβακίλλων που απομονώθηκαν από τον εντερικό σωλήνα θηλαζόντων νεογνών, σε διαφορετικά πρεβιοτικά υποστρώματα, συγκεκριμένα γλυκόζης, ινουλίνης, φρουκτοολιγοσακχαριτών (FOS) και β-γλυκανών. Β) Ο έλεγχος ύπαρξης αντιλιστεριακής δράσης ορισμένων στελεχών λακτοβακίλλων καλλιεργημένων σε γλυκόζη και FOS.
Υλικά-μέθοδοι: Α) Στελέχη του γένους Lactobacillus spp., τα οποία έχουν απομονωθεί από τον εντερικό μικροβιόκοσμο υγιών νεογνών (Συλλογή Χαροκοπείου Πανεπιστημίου), καλλιεργήθηκαν σε τρυβλία με θρεπτικό υλικό MRS agar, στο οποίο είχε προστεθεί, ως πηγή C
γλυκόζη, είτε FOS, είτε ινουλίνη, είτε β γλυκάνες και έγινε αναερόβια επώαση των στελεχών στους 37οC. Παρατηρήθηκε και συγκρίθηκε η ανάπτυξή τους στις 24, στις 48 και τις 72 ώρες. Β) Για τον έλεγχο της αντιλιστεριακής δράσης επιλέχθηκαν και χρησιμοποιήθηκαν «ενεργοποιημένες καλλιέργειες» από τα στελέχη λακτοβακίλλων που σημείωσαν την καλύτερη ανάπτυξη στα θρεπτικά υλικά με πηγή C γλυκόζη ή FOS. Ο έλεγχος της αντιλιστεριακής δράσης
έγινε με δύο πειραματικές μεθόδους, την μέθοδο ΕΜΒΟΛΙΑΣΜΟΥ ΤΡΥΒΛΙΩΝ (SPOT INOCULATION METHOD) και την μέθοδο ΔΙΑΧΥΣΗΣ ΣΕ ΑΓΑΡ (agar well diffusion assay).
Αποτελέσματα-Συμπεράσματα: Α) Όλα τα υπό εξέταση στελέχη αναπτύσσονται στα θρεπτικά υποστρώματα που περιέχουν ως πηγή άνθρακα γλυκόζη, FOS ή ινουλίνη, ενώ ορισμένα από αυτά αναπτύχθηκαν αρκετά καλά και στο υπόστρωμα που περιείχε β-γλυκάνη. Εκείνα τα υποστρώματα που ευνόησαν περισσότερο την ανάπτυξη των λακτοβακίλλων ήταν της γλυκόζης και των FOS. Σε ορισμένα στελέχη μάλιστα παρατηρήθηκε καλύτερη ανάπτυξη στο υπόστρωμα FOS από ότι στη γλυκόζη. Β) Σε καμία από τις δύο μεθόδους δεν ανιχνεύτηκε στέλεχος με εμφανή αντιλιστεριακή δράση, δηλαδή εμφάνιση ξεκάθαρων διαυγών ζωνών γύρω από τα εμβολιασμένα σημεία. Το αποτέλεσμα αυτό, δεν μπορεί σε καμία περίπτωση να γενικευτεί ως προς το σύνολο των λακτοβάκιλων, πόσο μάλλον ως προς το σύνολο των προβιοτικών μικροοργανισμών. Κάθε στέλεχος είναι μοναδικό και διαθέτει ξεχωριστές ιδιότητες. Για τον λόγο αυτό, το συμπέρασμα της παρούσας έρευνας περιορίζεται στην αλληλεπίδραση των συγκεκριμένων προβιοτικών στελεχών με τα συγκεκριμένα στελέχη λιστέριας που χρησιμοποιήθηκαν.
επιστημονικό ενδιαφέρον. Το Listeria monocytogenes είναι ένα από τα πιο ισχυρά τροφογενή παθογόνα βακτήρια, με ανθεκτικότητα σε συνθήκες επεξεργασίας τροφίμων, που μπορεί να γίνει επικίνδυνο για την υγεία του ξενιστή, ιδιαίτερα για ευαίσθητες ομάδες του πληθυσμού
όπως οι εγκυμονούσες ή οι ανοσοκατεσταλμένοι ασθενείς, ενώ σε ορισμένες περιπτώσεις μπορεί να οδηγήσει μέχρι και στο θάνατο.
Σκοπός: Α) Η μελέτη της καλλιέργειας και της ανάπτυξης in vitro προβιοτικών στελεχών, συγκεκριμένα λακτοβακίλλων που απομονώθηκαν από τον εντερικό σωλήνα θηλαζόντων νεογνών, σε διαφορετικά πρεβιοτικά υποστρώματα, συγκεκριμένα γλυκόζης, ινουλίνης, φρουκτοολιγοσακχαριτών (FOS) και β-γλυκανών. Β) Ο έλεγχος ύπαρξης αντιλιστεριακής δράσης ορισμένων στελεχών λακτοβακίλλων καλλιεργημένων σε γλυκόζη και FOS.
Υλικά-μέθοδοι: Α) Στελέχη του γένους Lactobacillus spp., τα οποία έχουν απομονωθεί από τον εντερικό μικροβιόκοσμο υγιών νεογνών (Συλλογή Χαροκοπείου Πανεπιστημίου), καλλιεργήθηκαν σε τρυβλία με θρεπτικό υλικό MRS agar, στο οποίο είχε προστεθεί, ως πηγή C
γλυκόζη, είτε FOS, είτε ινουλίνη, είτε β γλυκάνες και έγινε αναερόβια επώαση των στελεχών στους 37οC. Παρατηρήθηκε και συγκρίθηκε η ανάπτυξή τους στις 24, στις 48 και τις 72 ώρες. Β) Για τον έλεγχο της αντιλιστεριακής δράσης επιλέχθηκαν και χρησιμοποιήθηκαν «ενεργοποιημένες καλλιέργειες» από τα στελέχη λακτοβακίλλων που σημείωσαν την καλύτερη ανάπτυξη στα θρεπτικά υλικά με πηγή C γλυκόζη ή FOS. Ο έλεγχος της αντιλιστεριακής δράσης
έγινε με δύο πειραματικές μεθόδους, την μέθοδο ΕΜΒΟΛΙΑΣΜΟΥ ΤΡΥΒΛΙΩΝ (SPOT INOCULATION METHOD) και την μέθοδο ΔΙΑΧΥΣΗΣ ΣΕ ΑΓΑΡ (agar well diffusion assay).
Αποτελέσματα-Συμπεράσματα: Α) Όλα τα υπό εξέταση στελέχη αναπτύσσονται στα θρεπτικά υποστρώματα που περιέχουν ως πηγή άνθρακα γλυκόζη, FOS ή ινουλίνη, ενώ ορισμένα από αυτά αναπτύχθηκαν αρκετά καλά και στο υπόστρωμα που περιείχε β-γλυκάνη. Εκείνα τα υποστρώματα που ευνόησαν περισσότερο την ανάπτυξη των λακτοβακίλλων ήταν της γλυκόζης και των FOS. Σε ορισμένα στελέχη μάλιστα παρατηρήθηκε καλύτερη ανάπτυξη στο υπόστρωμα FOS από ότι στη γλυκόζη. Β) Σε καμία από τις δύο μεθόδους δεν ανιχνεύτηκε στέλεχος με εμφανή αντιλιστεριακή δράση, δηλαδή εμφάνιση ξεκάθαρων διαυγών ζωνών γύρω από τα εμβολιασμένα σημεία. Το αποτέλεσμα αυτό, δεν μπορεί σε καμία περίπτωση να γενικευτεί ως προς το σύνολο των λακτοβάκιλων, πόσο μάλλον ως προς το σύνολο των προβιοτικών μικροοργανισμών. Κάθε στέλεχος είναι μοναδικό και διαθέτει ξεχωριστές ιδιότητες. Για τον λόγο αυτό, το συμπέρασμα της παρούσας έρευνας περιορίζεται στην αλληλεπίδραση των συγκεκριμένων προβιοτικών στελεχών με τα συγκεκριμένα στελέχη λιστέριας που χρησιμοποιήθηκαν.
Ημερομηνία κατάθεσης:
2021-10-29
Γλώσσες Τεκμηρίου:
Ελληνικά
Θεματικές Κατηγορίες:
Μικροβιολογία
Λοιπά Θέματα:
Μικροοργανισμοί
Πρεβιοτικά
Πρεβιοτικά
Λέξεις-κλειδιά:
λιστέρια, φρουκτοολιγοσακχαρίτες, β-γλυκάνη, ινουλίνη, λακτοβάκιλλοι
Περιγραφή:
71 σ.,εικ.,πίν.
Άδεια χρήσης:
Αναφορά Δημιουργού – Μη Εμπορική Χρήση – Όχι Παράγωγα Έργα 4.0
