Πρωτότυπος Τίτλος:
In vitro έλεγχος προβιοτικών ιδιοτήτων σε απομονώσεις του γένους Lactobacillus από τον εντερικό μικροβιόκοσμο υγιών νεογνών
Συγγραφέας:
Τραγάρη, Πελαγία, Βασίλειος
Επιβλέπων καθηγητής:
Κυριακού, Αδαμαντίνη
Περίληψη:
Εισαγωγή O εντερικός μικροβιόκοσμος παίζει καθοριστικό ρόλο στην υγεία του ανθρώπου, επηρεάζοντας μεταξύ άλλων το ανοσοποιητικό σύστημα και την εμφάνιση φλεγμονών. Τα προβιοτικά βακτήρια, και ειδικότερα τα στελέχη των λακτοβακίλλων, έχουν μελετηθεί για τις ευεργετικές τους δράσεις στην αποκατάσταση της εντερικής ισορροπίας, την ανοσορύθμιση και την ενίσχυση της βλεννογονικής άμυνας. Η παρούσα εργασία στοχεύει στη μελέτη των πιθανών ανοσορυθμιστικών ιδιοτήτων εννέα στελεχών λακτοβακίλλων των ειδών Lacticaseibacillus rhamnosus, Lactobacillus gasseri, και Lactiplantibacillus plantarum μέσω της in vitro επίδρασής τους σε επιθηλιακά κύτταρα Caco-2. Εξετάζεται η ικανότητα των στελεχών να επάγουν την έκκριση ιντερλευκίνης-6 (IL-6) και μονοξειδίου του αζώτου (NO), καθώς και η βιωσιμότητα των κυττάρων μετά τη συνεπώαση. Παράλληλα, αξιολογείται η ανθεκτικότητα των στελεχών στην παρουσία χολικών αλάτων, βασικό κριτήριο για τον χαρακτηρισμό τους ως προβιοτικά.
Μεθοδολογία Τα βακτηριακά στελέχη καλλιεργήθηκαν και προετοιμάστηκαν για συνεπώαση με τα Caco-2 κύτταρα. Δοκιμάστηκαν τόσο ζωντανά όσο και θερμικώς απενεργοποιημένα στελέχη σε διαφορετικούς χρόνους επώασης (2 και 24 ώρες). Η παραγωγή NO μετρήθηκε με φασματοφωτομετρική μέθοδο μέσω πρότυπης καμπύλης NaNO₂, ενώ η έκκριση IL-6 προσδιορίστηκε με ανοσοενζυμική μη ανταγωνιστική μέθοδο ELISA. Η κυτταροτοξικότητα και η βιωσιμότητα των Caco-2 αξιολογήθηκαν με κατάλληλες μεθόδους κυτταρομετρίας. Έγινε στατιστική ανάλυση με χρήση ANOVA και μη παραμετρικών ελέγχων, όπου χρειάστηκε.
Αποτελέσματα Η παραγωγή NO παρουσίασε μικρές αυξομειώσεις ανάλογα με το στέλεχος και τη θερμική επεξεργασία, χωρίς όμως στατιστικά σημαντικές διαφορές (p>0,05). Η έκκριση IL-6 εμφάνισε διακυμάνσεις, με κάποια στελέχη να επάγουν αυξημένη παραγωγή σε σχέση με τον αρνητικό ή τον θετικό μάρτυρα. Η κυτταροτοξικότητα παρέμεινε χαμηλή για τα περισσότερα στελέχη, ιδιαίτερα για τα θερμικώς απενεργοποιημένα, επιβεβαιώνοντας την ασφάλεια τους για χρήση. Η ανάπτυξη των στελεχών παρουσία χολικών αλάτων ήταν επιτυχής, ενισχύοντας το προβιοτικό τους προφίλ.
Συμπεράσματα Ορισμένα στελέχη λακτοβακίλλων παρουσιάζουν πιθανές ανοσορυθμιστικές ιδιότητες μέσω της επίδρασής τους στην παραγωγή κυτταροκινών και NO από τα εντερικά επιθηλιακά κύτταρα. Αν και τα αποτελέσματα δεν παρουσίασαν στατιστικά ισχυρές διαφορές, εντούτοις αναδεικνύονται τάσεις που αξίζει να διερευνηθούν περαιτέρω. Τα στελέχη έδειξαν καλή ανθεκτικότητα στα χολικά άλατα και χαμηλή κυτταροτοξικότητα, ενισχύοντας τις προοπτικές αξιοποίησής τους ως προβιοτικά.
Μεθοδολογία Τα βακτηριακά στελέχη καλλιεργήθηκαν και προετοιμάστηκαν για συνεπώαση με τα Caco-2 κύτταρα. Δοκιμάστηκαν τόσο ζωντανά όσο και θερμικώς απενεργοποιημένα στελέχη σε διαφορετικούς χρόνους επώασης (2 και 24 ώρες). Η παραγωγή NO μετρήθηκε με φασματοφωτομετρική μέθοδο μέσω πρότυπης καμπύλης NaNO₂, ενώ η έκκριση IL-6 προσδιορίστηκε με ανοσοενζυμική μη ανταγωνιστική μέθοδο ELISA. Η κυτταροτοξικότητα και η βιωσιμότητα των Caco-2 αξιολογήθηκαν με κατάλληλες μεθόδους κυτταρομετρίας. Έγινε στατιστική ανάλυση με χρήση ANOVA και μη παραμετρικών ελέγχων, όπου χρειάστηκε.
Αποτελέσματα Η παραγωγή NO παρουσίασε μικρές αυξομειώσεις ανάλογα με το στέλεχος και τη θερμική επεξεργασία, χωρίς όμως στατιστικά σημαντικές διαφορές (p>0,05). Η έκκριση IL-6 εμφάνισε διακυμάνσεις, με κάποια στελέχη να επάγουν αυξημένη παραγωγή σε σχέση με τον αρνητικό ή τον θετικό μάρτυρα. Η κυτταροτοξικότητα παρέμεινε χαμηλή για τα περισσότερα στελέχη, ιδιαίτερα για τα θερμικώς απενεργοποιημένα, επιβεβαιώνοντας την ασφάλεια τους για χρήση. Η ανάπτυξη των στελεχών παρουσία χολικών αλάτων ήταν επιτυχής, ενισχύοντας το προβιοτικό τους προφίλ.
Συμπεράσματα Ορισμένα στελέχη λακτοβακίλλων παρουσιάζουν πιθανές ανοσορυθμιστικές ιδιότητες μέσω της επίδρασής τους στην παραγωγή κυτταροκινών και NO από τα εντερικά επιθηλιακά κύτταρα. Αν και τα αποτελέσματα δεν παρουσίασαν στατιστικά ισχυρές διαφορές, εντούτοις αναδεικνύονται τάσεις που αξίζει να διερευνηθούν περαιτέρω. Τα στελέχη έδειξαν καλή ανθεκτικότητα στα χολικά άλατα και χαμηλή κυτταροτοξικότητα, ενισχύοντας τις προοπτικές αξιοποίησής τους ως προβιοτικά.
Ημερομηνία κατάθεσης:
2025-09-17
Γλώσσες Τεκμηρίου:
Ελληνικά
Θεματικές Κατηγορίες:
Διατροφή (Γενικά). DRI’s
Λοιπά Θέματα:
Πεπτικό σύστημα - Μικροβιολογία
Λέξεις-κλειδιά:
Λακτοβάκιλλοι, προβιοτικά, Μονοξείδιο του Αζώτου, Ιντερλευκίνη-6
Περιγραφή:
64 σ.,εικ.,πίν.,διαγρ.
Άδεια χρήσης:
Αναφορά Δημιουργού – Μη Εμπορική Χρήση – Όχι Παράγωγα Έργα 4.0
